当前位置:首页 > 行业动态 > 超净工作台在康乃馨的离体快繁的应用
超净工作台在康乃馨的离体快繁的应用
发布时间:2011-12-26 08:53:50   浏览:3721

超净工作台在康乃馨的离体快繁的应用

一、 仪器设备和试剂

超净工作台、带有吸水纸的成套的培养皿,无菌水

培养基 N6+1 mg/L 6-BA

剪刀、枪型镊子

量筒、酒精灯、滤纸、蒸馏水、小刷子

95%乙醇、70%酒精、70%酒精棉球、0.2%升汞、甲醛、高锰酸钾、来苏尔

纱布、棉塞、牛皮纸、才培纯、肥皂、酒精喷壶

植物的嫩茎、侧芽、茎尖、叶片、花、愈伤组织上的不定芽、胚状体、试管苗等

二、实验材料 康乃馨枝条

三、方法和步骤

1 外植体灭菌 取从市场上购买的康乃馨枝条,去掉大的叶片,剪取带腋芽的节结,用肥皂(洗洁精)清洗表面,再用自来水冲洗 30-60分钟,然后在无菌室(超净工作台)内用70%酒精浸没20-40秒钟(根据材料的木质化程度掌握具体的浸没时间。用0.2% 的升汞溶液浸泡10-15分钟,再用无菌水冲洗3-4次,放入已灭菌的培养皿中的滤纸上待用。

2 接种 先进行无菌室内消毒,用紫外灯照射30-45分钟,地面用低浓度的来苏尔溶液消毒,紫外灯关闭约20分钟后方可进去工作。

超净工作台消毒 开启无菌风开关,让无菌风吹上30-45分钟后方可工作。并用70%的酒精棉球擦净工作台。

接种时先点燃酒精灯,镊子和剪刀都要先浸泡在70%的酒精溶液中。用酒精灯上灼烧好冷却后的镊子、剪刀取出一个侧芽或小段茎,迅速打开三角瓶口,将材料才插入瓶内,注意材料上下端的极性,不能倒插。在酒精灯边塞回锡箔纸,用记号笔在瓶体上写明日期和材料。

3 培养条件: 25℃光照13小时/天 光强1000 Lux

4 继代培养(见下一个实验)

5 诱导生根:用低浓度的吲哚乙酸或者萘乙酸或无激素的N6培养基诱导生根

6 试管苗移栽〈参见有关其它实验〉

本文由 风淋室 http://www.fenglins.com/首发,转载请注明来源!联系人:苏布会-13570963006

上一篇:如何购买到性价高的风淋室(整理篇)... 下一篇:超净工作台在胡萝卜愈伤组织建立实验中的应...